10.3969/j.issn.1002-1256.2021.22.001
上调HBO1基因对亚溶解型C5b-9刺激大鼠GMCs生成CCL5的作用机制研究
目的 研究上调乙酰基转移酶(HBO1)基因对亚溶解型C5b-9复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)生成趋化因子CCL5的作用机制.方法 构建外源性真核表达重组质粒pIRES2-HBO1,利用NeonTM电转仪将重组质粒转染至体外培养的GMCs中,免疫印迹(WB)实验鉴定外源性过表达HBO1的结果.再进行分组实验(MEM组、pIRES2组、亚溶解型C5b-9组,以及pIRES2-HBO1+亚溶解型C5b-9组).分别用实时PCR和ELISA法检查不同分组处理后CCL5的mRNA和蛋白水平,并用荧光素酶报告实验检测CCL5的启动子活性情况.结果 WB实验表明,真核表达重组质粒pIRES2-HBO1构建成功.用pIRES2-HBO1转染GMCs后,GMCs在亚溶解型C5b-9复合物的刺激下生成CCL5基因的水平及其启动子活性均显著升高.结论 成功构建了pIRES2-HBO1真核表达重组质粒,并初步证实HBO1基因表达能够正向调控亚溶解型C5b-9诱导大鼠GMCs生成趋化因子CCL5.
HBO1基因;亚溶解型C5b-9;肾小球系膜细胞;C-C基序趋化因子5
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R692(泌尿科学(泌尿生殖系疾病))
安徽省教育厅重点项目;蚌埠医学院自然科学基金面上项目
2021-12-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共5页
1933-1937