两种不同单克隆法筛选大鼠腰椎终板软骨干细胞能力的比较

摘要：

目的 比较两种不同的单克隆方法获取大鼠腰椎终板软骨干细胞筛选能力.方法 获取大鼠腰椎终板软骨组织后,Ⅱ型胶原酶消化法获取原代细胞(P0),将P0代细胞按照100个/cm2、200个/cm2、300个/cm2的密度接种于10 cm培养皿上,为P0组;将原代细胞先接种于T25培养瓶,待其贴壁融合30％～40％时再消化,按照100个/cm2、200个/cm2、300个/cm2的密度接种于10 cm培养皿,为P1组.倒置相差显微镜下观察两组细胞集落形成速度及生长形态;0.1％结晶紫染色,计算两组的集落形成百分比;使用干细胞表面标记物CD44和CD90,流式细胞仪检测两组获取干细胞的纯度.结果 将两组的细胞按上述密度进行培养后,P1组细胞集落形成时间早于P0组,且集落数目也较P0组多,但镜下观察其细胞形态及集落形态不如P0组;P1组的集落形成数目远大于P0组,两组按照100个/cm2的密度接种时,其细胞集落形成百分比最大;流式细胞仪检测,对于CD44,P0组表达率(92.17±1.26)％,P1组为(74.37±2.63)％;对于CD90,P0组表达率(95.30±3.42％),P1组为(90.87±1.42％).结论 两种不同的单克隆方法都可以筛选出大鼠腰椎终板软骨干细胞,但是使用原代细胞直接接种时,得到的干细胞纯度更高.

关键词：单克隆筛选法、干细胞终板软骨干细胞纯度

所属期刊栏目：39

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目81572185;安徽省自然科学基金面上项目1708085MH185;安徽省科技厅对外科技合作项目1704e1002229;2017安徽省高校学科专业拔尖人才学术资助项目gxgbZD20;芜湖市科技成果转化计划项目2017cg20

在线出版日期：2018-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：306-308