从黑色素瘤荷瘤小鼠中分离纯化髓系抑制性细胞
目的:从黑色素瘤荷瘤小鼠脾脏中分离得到CD11b+Gr-1+的髓系抑制性细胞( Myeloid derived suppressor cells ,MDSCs)。方法给C57BL/6小鼠注射LPS或者小鼠黑色素瘤细胞株B16BL6后,取小鼠的脾脏细胞,检测其中CD11b+Gr-1+的MDSCs 细胞的比例。通过流式细胞仪( flow cytometry, FCM)分选出CD11b+Gr-1+的细胞,培养24小时后,CBA(cytometric bead array)法检测其分泌IL-10的情况;提取CD11b+Gr-1+细胞的总RNA,利用RT-PCR的方法检测其表达IFN-β、TGF-β、iNOS、ARG-1和IDO的情况。结果与注射LPS相比,注射B16BL6细胞株的小鼠脾脏中CD11b+Gr-1+的MDSCs细胞的比例更高;利用FCM分选得到CD11b+Gr-1+的MDSCs,进一步鉴定发现其表达IL-10、IFN-β、TGF-β、iNOS、ARG-1和IDO。与先前报道的MDSCs的特征相一致。结论可从B16BL6荷瘤小鼠脾脏中获得高纯度的MDSCs用于实验研究。
髓系抑制性细胞、黑色素瘤、脾脏
R39;R33
国家自然科学基金81001308,81373130;国家级大学生创新创业训练计划项目;扬州大学“新世纪人才工程”资助。
2014-09-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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