磷酸胆碱聚合物载AT1受体siRNA对血管内皮细胞AT1受体表达的影响

摘要：

目的 探讨新型阳离子磷酸胆碱聚合物MPC30-DEA70载AT1受体siRNA对血管内皮细胞AT1受体表达的影响.方法 应用琼脂糖凝胶电泳表征具有不同N/P比值的MPC30-DEA70与siRNA的复合物；将不同比例的MPC30-DEA70/siRNA基因复合物转染至人脐静脉内皮细胞,应用荧光显微镜(FM)检测其细胞内分布；流式细胞术(FCM)检测转染效率及荧光强度；Western blot法和RT-PCR法检测AT1受体蛋白及mRNA的表达情况.结果 不同N/P比值的基因复合物在电泳中可见不同程度的迟滞现象,随正电性增强而显著.FM观察到MPC30-DEA70/siRNA复合物分布在细胞核周围,FCM结果显示随N/P比值的增大,转染效率明显增加,荧光强度也随之增强.RT-PCR法和Western blot法显示随着N/P比值的增大,基因复合物可使AT1受体的mRNA和蛋白表达明显下降(P＜0.05).结论 MPC30-DEA70可作为AT1受体siRNA的载体转染至血管内皮细胞,下调AT1受体的mRNA及蛋白的表达,提示阳离子磷酸胆碱聚合物可以有效负载和运输siRNA,抑制特异基因的表达,是一种有效的非病毒类转基因载体.

关键词：磷酸胆碱聚合物、siRNA、AT1受体、非病毒转基因载体

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分类号：R31;S82

资助基金：本课题受国家自然科学基金30800219,30670557;江苏省高校自然科学基金08KJD320013;徐州医学院院长专项人才基金07KJZ26

在线出版日期：2013-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2185-2188