慢病毒介导的绿色荧光蛋白报告基因对人前列腺癌PC-3细胞的标记

摘要：

目的 探讨慢病毒介导的绿色荧光蛋白(GFP)标记人前列腺癌PC-3细胞是否影响其细胞生物学特性,以及GFP基因能否持久稳定表达,为下一步实验奠定基础.方法 常规肿瘤细胞培养、传代,在细胞状态最佳时以不同病毒感染复数(MOI)实行GFP慢病毒对PC-3的感染,7天后在荧光显微镜下观察GFP在PC-3的表达情况.选取感染GFP阳性表达率最高的孔继续培养传代至第三代后,分别用镜下形态观、MTT测生长曲线、划痕实验来对比两种细胞的形态、活性、生长速度和生长状态,以评价GFP基因在PC-3细胞表达的稳定性.结果 置荧光显微镜下,转染72h后,部分PC-3细胞可见绿色荧光,转染一周,绿色荧光表达最强.其中以MOI=20感染率最高,GFP阳性表达率为(92.3±1.2)%,GFP/ PC-3在体外持续培养2、4、8周GFP阳性率没有明显变化.镜下形态观、MTT测生长曲线、划痕实验等结果显示,与转染前相比,慢病毒感染PC-3后,对细胞活力、增殖、凋亡和周期均没有影响(P>0.05).结论 GFP慢病毒能够高效标记PC-3,并且不影响其生物学特性,GFP基因在PC-3能够持久稳定表达,可以用于下一步的细胞示踪研究.

关键词：PC-3细胞、慢病毒属、绿色荧光蛋白

所属期刊栏目：33

分类号：S51;S31

资助基金：研究生创新课题基金2010105981002M185

在线出版日期：2012-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1413-1416