流感病毒RNA聚合酶PA亚基重组质粒pQE32-PA-2转化效率的实验研究

摘要：

目的将甲型流感病毒RNA聚合酶PA亚基的基因工程重组质粒pQE32-PA-2转化入受体菌,并优化转化条件,以建立其高效、快速的转化体系.方法以大肠杆菌DH5α菌株为受体菌,研究了氯化钙溶液浓度(0、25、50、75、100、150mmol/L),热休克温度(0、30、37、42、50℃),转化时间(7、15、30、45、60、75、90、105、120min)及转化后的温浴时间(0、0.5、1、1.5、2hr)对基因工程重组质粒pQE32-PA-2转化效率的影响.结果氯化钙溶液浓度及热休克温度对转化效率的影响极为显著,转化时间在一定范围内对转化效率有明显的影响,而转化后的温浴时间对转化效率的影响不明显.结论在本实验条件下,以75mmol/L氯化钙制备感受态细胞,转化30分钟,经42℃热休克作用90秒后直接涂平板选择转化子,可获得高效、快速的转化效果.

关键词：重组质粒、转化、流感病毒

所属期刊栏目：24

分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：121-123