10.16073/j.cnki.cjcpt.2023.14.03
环状RNAcircWHSC1在结肠癌的表达及相关分子机制研究
目的 探讨环状 RNAcircWHSC1 在结肠癌发生发展过程中的作用及其相关分子机制.方法 选取 2017-01-01-2021-01-31 郑州人民医院病理确诊为结肠癌的 60 例患者癌及癌旁组织(距癌旁≥5 cm),按照circWHSC1 表达水平将患者分为高表达组(≥3.44,33 例)与低表达组(＜3.44,27 例).Kaplan-Meier plotter法分析circWHSC1 表达与患者预后生存的关联性.通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测circWHSC1、miR-142-3p和RAC1 的表达;采用蛋白质印迹法、CCK-8 和Transwell检测其蛋白的表达、细胞的增殖和转移能力;双荧光素酶报告基因和 RT-PCR验证circWHSC1、miR-142-3p和RAC1 三者之间的作用关系.结果 circWHSC1 在结肠癌患者癌组织(3.74±1.60)中的表达高于癌旁组织(1.07±0.58),t=7.572,P＜0.001;与circWHSC1 低表达组相比,circWHSC1 高表达组结肠癌患者的生存时间缩短,χ2=12.321,P＜0.001.结肠癌细胞系 HCT116 的circWHSC1 表达量最高,F=29.380,P＜0.001.敲低circWHSC1 可抑制 HCT116 细胞的增殖(t=12.775,P＜0.001)、迁移(t=46.973,P＜0.001)和侵袭能力(t= 40.935,P＜0.001).双荧光素酶报告基因显示,circWHSC1 与miR-142-3p具有靶向关系,而敲低circWHSC1 可增加HCT116 细胞中miR-142-3p表达水平,t=17.705,P＜0.001.在敲低circWHSC1 基础上应用miR-142-3p抑制剂则可以增强 HCT116 细胞的增殖(t=7.304,P=0.002)、迁移(t=16.049,P＜0.001)和侵袭能力(t=14.994,P＜0.001).miR-142-3p在结肠癌患者癌组织中的表达低于癌旁组织,t=12.599,P＜0.001.双荧光素酶报告基因实验证实,RAC1为miR-142-3p的靶基因,过表达miR-142-3p可抑制 HCT116 细胞中 RAC1 蛋白表达水平(t=25.162,P＜0.001),并且发现,在敲低circWHSC1 基础上过表达RAC1 同样可以增强 HCT116 细胞的增殖(t=7.658,P=0.002)、迁移(t= 62.626,P＜0.001)和侵袭能力(t=58.596,P＜0.001).RAC1 在结肠癌患者癌组织中的表达同样高于癌旁组织(t= 14.873,P＜0.001),敲低circWHSC1 可在抑制 HCT116 细胞中RAC1 表达的同时,抑制其下游 PAK1 蛋白 RAC1、PAK1及p-PAK1 的表达和激活,t值分别为 7.506、15.588 和 6.795,P值分别为 0.001、＜0.001 和 0.002.结论 circWHSC1可能通过调控miR-142-3p/RAC1/PAK1 轴参与结肠癌的发生过程,为未来临床结肠癌早期诊断和治疗提供新的靶点.
结肠癌、基因、circWHSC1、基因、miR-142-3p、RAC1/PAK信号通路
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R735.3(肿瘤学)
河南省科技攻关项目18210231310237
2023-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
843-851
