10.16073/j.cnki.cjcpt.2023.11.04
高迁移率族蛋白B1介导癌症相关成纤维细胞促进结直肠癌转移的机制研究
目的 探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)介导癌症相关成纤维细胞(CAFs)活化在结直肠癌转移中的作用.方法 从结直肠癌及癌旁组织中,分离提纯癌旁正常成纤维细胞(NFs)和CAFs,分别与人结直肠癌细胞SW480共培养,划痕实验和Transwell侵袭实验检测NFs和CAFs对SW480迁移、侵袭的作用.免疫组化法检测HMGB1在结直肠癌、癌旁正常结直肠组织中表达.蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测NFs、CAFs中HMGB1 mRNA和蛋白的表达水平.ELISA法检测上清液中HMGB1表达.应用小干扰RNA(siRNA)技术抑制CAFs细胞内HMGB1基因表达,qRT-PCR和蛋白质印迹法分别检测阴性对照转染组(CAFs-siNC组)与HMGB1-siRNA转染组(CAFs-siHMGB1组)中HMGB1、a平滑肌肌动蛋白(αSMA)基因和蛋白的表达情况,2组细胞分别与SW480细胞共培养后,划痕实验和Tran-swell侵袭实验验证HMGB1表达对SW480迁移和侵袭的影响.结果 NFs与SW480细胞共培养迁移率为(25.51±46.96)％,侵袭细胞数为(92.97±9.36)个,CAFs与SW480细胞共培养迁移率为(63.38±9.25)％,侵袭细胞数为(129.56±10.93)个,差异均有统计学意义,t值分别为5.665和4.405,P值分别为0.005和0.012.HMGB1在正常结直肠组织中表达较低或不表达,而在结直肠癌组织中高表达.CAFs细胞中HMGB1 mRNA和蛋白表达分别为1.918±0.082和0.834±0.051,细胞上清液 HMGB1 浓度值为 253.538±22.873,均高于 NFs 细胞,均 P＜0.05.CAFs-siHMGB1 组中 HMGB1 mRNA、α-SMA mRNA、HMGB1 蛋白、α-SMA蛋白表达分别为 0.385±0.038、0.511±0.029、0.649±0.040、0.475±0.039,CAFs-siNC组中分别为 1.002±0.051,0.998±0.047、0.964±0.031、0.746±0.047,差异均有统计学意义,均 P＜0.05.CAFs-siNC与SW480细胞共培养迁移率为(62.99±｝)％,侵袭细胞数为(125.38±11.54)个,CAFs-siHMGB1与SW480细胞共培养迁移率为(26.22±6.48)％,侵袭细胞数为(83.58±10.51)个,差异均有统计学意义,t值分别为5.522和4.638,P值分别为0.005和0.010.结论 CAFs能促进SW480细胞迁移、侵袭.HMGB1在CAFs细胞和结直肠癌组织中均高表达,抑制CAFs细胞中HMGB1表达能够减弱CAFs对SW480细胞迁移、侵袭的促进作用.
结直肠癌、高迁移率族蛋白B1、癌症相关成纤维细胞、肿瘤侵袭、肿瘤转移
30
R735.3+4(肿瘤学)
青岛大学附属泰安市中心医院苗圃项目2021MPM17
2023-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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