10.16073/j.cnki.cjcpt.2023.11.03
6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶对肺癌细胞增殖及铁死亡的影响
目的 探讨6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGD)对肺癌细胞增殖及铁死亡影响,分析6PGD在肺癌中的生物学功能.方法 蛋白质印迹法检测6PGD在人肺癌细胞(PC9、H1975、A549、H1299、H460)和人正常肺支气管上皮细胞(BEAS-2B)中的表达.选取肺癌A549和H460细胞进行慢病毒转染以敲低6PGD的表达,分别获得A549 sh-NC、A549 sh-6PGD、H460 sh-NC和H460 sh-6PGD组.采用不同浓度(0、20、40和60 μmol/L)6PGD活性抑制剂大黄素甲醚分别处理肺癌细胞.采用铁死亡抑制剂ferrostatin-1处理A549 sh-6PGD和H460 sh-6PGD细胞,分别获得A549 sh-6PGD-fer-rostatin-1和H460 sh-6PGD-ferrostatin-1组.CCK8法检测细胞增殖能力.流式细胞术检测细胞内脂质过氧化物及活性氧水平,蛋白质印迹法检测细胞内GPX4及SLC7A11水平,组间比较采用t检验.结果 6PGD在肺癌细胞PC9、H1975、A549、H1299和H460的表达量均高于正常肺支气管上皮细胞BEAS-2B,t值分别为33.2、16.7、33.5、9.2和34.9,均 P＜0.05.慢病毒转染后,A549 sh-6PGD(0.45±0.06)和 H460 sh-6PGD 组(0.46±0.02)的细胞活力较 A549 sh-NC(1.00±0.00)和 H460 sh-NC 组(1.00±0.00)均降低,t值分别为 20.5 和 56.1,均 P＜0.001.采用不同浓度(0、20、40和60 μmol/L)大黄素甲醚抑制6PGD的功能,结果显示,A549和H460的细胞活力均降低.A549 sh-6PGD-fer-rostatin-1(0.74±0.05)和 H460 sh-6PGD-ferrostatin-1 组(0.78土0.03)的细胞活力较 A549 sh-6PGD(0.45±0.06)和H460 sh-6PGD组(0.46±0.02)均增加,t值分别为31.6和14.3,均P＜0.05.铁死亡抑制剂可降低大黄素甲醚对A549和H460的细胞毒性.A549 sh-6PGD和H460 sh-6PGD组的脂质过氧化物水平较A549 sh-NC和H460 sh-NC组均增加,t值分别为 14.1 和 63.0,均 P＜0.001.A549 sh-6PGD 和 H460 sh-6PGD 组的活性氧水平较 A549 sh-NC 和 H460sh-NC组均增加.蛋白质印迹法结果显示,A549 sh-6PGD和H460 sh-6PGD组的SLC7A11及GPX4蛋白表达水平较A549 sh-NC和H460 sh-NC组均降低.结论 6PGD促进肺癌细胞增殖,且通过减少活性氧水平以及促进GPX4和SLC7A11的表达负调控肺癌细胞铁死亡.
肺癌、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶、铁死亡、谷胱甘肽过氧化物酶4、脂质过氧化
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R734.2(肿瘤学)
国家自然科学基金;中国临床肿瘤学会恒瑞医药基金;中国临床肿瘤学会恒瑞医药基金
2023-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
647-653
