10.16073/j.cnki.cjcpt.2020.20.01
miR-101靶向PBX3对急性T淋巴细胞白血病细胞增殖和凋亡影响的机制
目的 探讨微小RNA-101(microRNA-101,miR-101)靶向前B细胞白血病同源盒基因3(pre-B-cell leukemia transcription factor 3,PBX3)影响急性T淋巴细胞白血病增殖和凋亡的机制.方法 培养人T淋巴细胞H9和急性T细胞白血病细胞系CCRF-CEM、Jurkat、TALL-104,实时荧光定量聚合酶反应(quantitative real-time polymerase chain re-action,qRT-PCR)法检测各细胞中miR-101和PBX3 mRNA表达.将Jurkat细胞分为miR-101 mimic组、mimic NC组、siRNA-PBX3组、siRNA-NC组、miR-101 mimic+pcDNA3.1-PBX3组和对照组,CCK8、流式细胞仪分别检测各组细胞增殖、凋亡,蛋白质印迹实验检测PBX3、p-JNK、p-p38、Ki-67、Cyclin D1、Bax和Bcl-2表达,双荧光素酶实验验证miR-101与PBX3的靶向关系.结果 在各急性T细胞白血病细胞系中,miR-101表达水平较人T淋巴细胞H9下调,F=93.633,P<0.001;PBX3 mRNA表达水平升高,F=473.094,P<0.001.细胞增殖实验结果显示,转染miR-101 mimic后,Jurkat细胞增殖能力显著下降,与对照组和mimic-NC组比较差异有统计学意义,并呈时间依赖,F分组=96.012,F时间=842.254,F分组×时间=19.225,均F<0.001;miR-101 mimic组Ki-67和Cyclin D1蛋白表达量分别为0.25±0.03、0.12±0.03,细胞凋亡率、Bax、Bcl-2蛋白表达量分别为15.59±0.67、0.90±0.06、0.11±0.02,与对照组(0.76±0.05、0.81±0.06、2.67±0.41、0.12±0.02、0.95±0.06)和mimic-NC组(0.79±0.07、0.75±0.05、2.62±0.45、0.12±0.03、0.93±0.05)比,均值差异均有统计学意义,F值分别为106.569、206.354,618.890、450.746和362.230,均P<0.001.干扰PBX3后,Jurkat细胞增殖能力下降,与对照组和si-NC组比较差异有统计学意义,并呈时间依赖,F分组=282.156、F时间=704.862、F分组×时间=22.591,均P<0.001;si-PBX3组Ki-67和Cyclin D1蛋白表达量分别为0.27±0.03、0.12±0.02,细胞凋亡率、Bax、Bcl-2蛋白表达量分别为17.49±0.90、0.90±0.06、0.23±0.02,与对照组(1.00±0.06、0.99±0.07、2.94±0.58、0.12±0.02、1.11±0.06)和si-NC组(0.99±0.06、0.98±0.06、2.60±0.54、0.13±0.02、1.10±0.05)比均值差异均有统计学意义,F值分别为216.041、247.643、550.390、472.060和349.782,均P<0.001.双荧光素酶实验和蛋白质印迹实验证实,PBX3为miR-101的靶基因;然而在共转染miR-101 mimic和pcD-NA3.1-PBX3后,miR-101 mimic的增殖抑制和促凋亡作用被逆转;蛋白质印迹实验证实,过表达miR-101能够抑制p-JNK、p-p38蛋白的表达,均P<0.05.结论 miR-101靶向PBX3可能是通过抑制MAPK信号通路来抑制Jurkat细胞增殖并促进凋亡.
miR-101、急性T淋巴细胞白血病、PBX3、细胞增殖、细胞凋亡、MAPK信号通路
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R733.7(肿瘤学)
2020-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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