RNA干扰HMGA2基因表达对人肾癌转移细胞株增殖与侵袭影响
目的 用分子生物学研究肾癌形成和进展,可为临床治疗提供更可靠的依据,高迁移率族蛋白A2(high mobility group A2,HMGA2)是近年来研究热点之一.本研究观察HMGA2对肾癌细胞增殖和侵袭能力影响,为肾癌进一步临床研究提供依据.方法 培养人肾癌细胞系786 O、769 P、人肾癌转移细胞系ACHN、人正常肾小管上皮细胞系HKC,研究分为3组,HMGA2-siRNA组、Mock-siRNA组和未转染组.利用RNA干扰技术,瞬时转染肾癌ACHN细胞,采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白质印迹法检测HMGA2mRNA及蛋白表达;MTT法检测干扰后ACHN细胞增殖能力;Transwell法检测干扰后ACHN细胞侵袭能力.结果 786-O、769-P、ACHN和HKC细胞系HMGA2 mRNA表达量分别为0.82±0.10、0.79±0.09、0.98±0.16和0.04±0.01,组内差异有统计学意义,F=63.36,P=0.002;4种细胞系中HMGA2蛋白表达量分别为0.80±0.09、0.75±0.08、0.94±0.10和0.06±0.02,组内差异有统计学意义,F=49.09,P=0.005.选择ACHN细胞作为后续研究:成功构建特异性沉默HMGA2表达的肾癌细胞株.在转染后24、48、72和96 h,HMGA2-siRNA组细胞增殖速度分别为0.69±0.02、0.90±0.05、0.99±0.07和1.10±0.09,Mock-siRNA组细胞增殖速度分别为0.89±0.03、1.36±0.06、1.82±0.08和2.10±0.10,未转染组细胞增殖速度分别为0.91±0.02、1.50±0.06、1.91±0.10和2.20±0.12.HMGA2-siRNA组细胞增殖速度低于Mock-siRNA组和未转染组,F组别=630.724,P＜0.001;F时间=566.968,P＜0.001;F组别×时间=51.328,P=0.002.在转染后48 h,HMGA2 siRNA组、Mock siRNA组及未转染组穿过细胞数的比值分别为0.34±0.04,0.87±0.09和0.91±0.10,F=6.42,P=0.039.结论 用HMGA2-siRNA干扰ACHN细胞,可抑制细胞增殖及侵袭能力,HMGA2基因在肾癌发生、发展中可能发挥“癌基因”作用,HMGA2基因及蛋白表达可能与肿瘤形成、进展和转移密切相关,有望成为肾癌治疗的一个重要靶点.
肾癌、高迁移率族蛋白A2、RNA干扰、增殖、侵袭
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R737.11(肿瘤学)
2019-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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