可溶性CD40配体对白血病THP-1细胞生物学影响及机制研究
目的 急性单核细胞白血病(acute monocytic leukemia,AMoL)具有易浸润、易复发、预后差和死亡率高等特点.可溶性CD40配体(soluble CD40 ligand,sCD40L)在肿瘤细胞抗原递呈等方面发挥重要作用.本研究分析不同浓度的sCD40L对人白血病THP-1细胞增殖、凋亡、侵袭迁移及对PI3K/AKT信号传导通路表达影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法 不同浓度2、4和6 μg/mL的sCD40L作用THP-1细胞24 h,采用CCK-8法检测sCD40L对THP-1细胞增殖抑制作用,流式细胞术Annexin V FITC/PI法检测细胞凋亡的影响,迁移实验Transwell法检测3组不同浓度sCD40L单用或者联合PI3K抑制剂LY294002对THP-1细胞迁移能力的影响,蛋白质印迹法检测PI3K/AKT信号传导通路中关键蛋白PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT、MMP-2和MMP-9蛋白表达.结果 CCK-8法检测2μg/mL的sCD40L A值为0.317±0.029,细胞增殖抑制率为(23.62±2.17)％,细胞凋亡率为(14.32±2.01)％;4 μg/mL的sCD40L A值为0.253±0.021,细胞增殖抑制率为(37.24±3.68)％,细胞凋亡率为(50.40±6.17)％;6 μg/mL的sCD40L作用THP-1细胞24 h后A值为0.196±0.017,细胞增殖抑制率为(52.13±4.96)％,细胞凋亡率为(67.53±7.26)％;对照组A值为0.58±0.05,增值抑制率为(11.63±1.07)％,细胞凋亡率为(8.79±0.92)％;增值抑制率之间比较,差异有统计学意义,F=83.184,P=0.001;细胞凋亡率之间比较,差异有统计学意义,F=100.759,P＜0.001;Transwell法结果显示,单独使用sCD40L干预,随着sCD40L浓度增加,细胞迁移能力逐渐降低,同时加入PI3K抑制剂LY294002后,细胞迁移能力降低,与对照组比较,差异有统计学意义,F=90.033,P＜0.001;蛋白质印迹法结果显示,随着sCD40L浓度增加,PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT、MMP-2和MMP-9蛋白表达随之降低,加入PI3K抑制剂LY294002后,AKT(F=5.394,P=0.004)、PI3K(F=5.689,P=0.004)、p-AKT(F=7.621,P=0.001)、p-PI3K(F=8.787,P＜0.001)、MMP-2(F=6.827,P=0.002)和MMP-9(F=11.903,P＜0.001)蛋白表达降低,与对照组比较,差异有统计学意义.结论 sCD40L能够在体外抑制白血病THP 1细胞增殖、诱导凋亡及抑制侵袭迁移,可能通过影响PI3K/AKT信号传导通路,抑制MMP-2和MMP-9蛋白表达发挥作用,为sCD40L用于AMoL的治疗提供了一定的实验依据.
可溶性CD40配体、THP-1细胞、细胞增殖、细胞凋亡、侵袭、迁移、PI3K/AKT信号通路
26
R733.7(肿瘤学)
贵州省卫生计生委科学技术基金gzwjk2015-1-002;贵州省社会发展攻关项目黔科合SY字20143025
2019-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
690-694
