let-7a调控自噬对缺氧状态卵巢癌HO-8910细胞增殖的影响
目的 自噬是细胞在不良环境中自我吞噬的生物学现象,在恶性肿瘤发病机制中具有重要作用,缺氧是诱导细胞自噬的重要因素.本研究探讨不同氧环境中卵巢癌HO-8910细胞let-7a的表达变化及对缺氧细胞自噬、增殖的影响.方法 实验分常氧组、缺氧组、缺氧+ miR-NC-mimics组和缺氧+let-7a-mimics组4组,各组细胞经处理48 h后:吖啶橙染色观察细胞自噬发生情况;MTT法分析细胞增殖变化,流式细胞术检测细胞周期分布;Real time PCR分析let-7a、Be-clin-1和LC3-Ⅱ的表达变化,蛋白质印迹试验分析Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白表达变化.结果 HO-8910细胞经缺氧处理后自噬率显著增高至(34.46±5.13)％,F=49.932,P=0.002;在缺氧基础上转染miR-NC-mimics后,自噬率变化不大,F=0.110,P=0.756;而转染let-7a-mimics后,细胞自噬率显著降低至(4.56±2.04)％,F=68.186,P＜0.001.缺氧使G0/G1期细胞数量明显增至(70.43±3.19)％,F=23.216,P=0.008;同时转染miR-NC-mimics后,其数量变化差异无统计学意义,F=0.467,P=0.532;而在缺氧条件下转染let-7a-mirnics,其数量则增至(82.37±3.45)％,F=67.423,P=0.001;并伴随细胞增殖抑制率显著上升,F=24.602,P=0.007.缺氧条件下以及缺氧同时转染miR-NC-mimics后,let-7a表达下调,而Beclin-1、LC3-Ⅱ表达上调;而在缺氧基础上转染let-7a-mimics后,let-7a表达明显增强,F=295.623,P＜0.001;Beclin-1蛋白表达下调,F=33.285,P=0.002;LC3-Ⅱ也明显下调,F=41.969,P=0.001.结论 卵巢癌HO-8910细胞在缺氧状态时,let-7a表达下调,细胞启动适度自噬保护机制,介导细胞逃避缺氧环境使细胞继续快速生长,当上调let-7a表达后,缺氧所致的适度自噬保护作用被消减,细胞增殖明显受抑.
细胞自噬、缺氧性细胞损伤、细胞凋亡、let-7a、卵巢癌
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R737.31(肿瘤学)
深圳市卫生计生系统博士创新项目201505012
2016-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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