西黄丸含药血清对人肝癌BEL-7404细胞增殖和凋亡及自噬的影响
目的 西黄丸有消坚化结、解毒散痈的功效,是中医抗癌名方,对实体肿瘤具有一定疗效.本研究观察西黄丸含药血清对人肝癌细胞株BEL-7404细胞增殖、凋亡与自噬的影响,旨在探讨其抗肿瘤作用的机制.方法 制备高、中和低剂量组西黄丸含药血清,分别处理BEL-7404细胞.MTT法检测细胞增殖;Annexin Ⅴ-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹法检测细胞自噬相关蛋白(LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ)的表达水平;单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverine,MDC)染色后激光共聚焦显微镜下观察细胞自噬体的情况.自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)联合西黄丸含药血清处理BEL-7404细胞,检测细胞增殖、凋亡和自噬相关蛋白表达水平.结果 高、中和低剂量组西黄丸含药血清处理24 h后,BEL-7404细胞的增殖抑制率分别为(32.7±3.4)％、(16.8±2.2)％和(8.8±1.9)％,明显高于对照组的(3.0±0.5)％,H=21.61,P＜0.001;细胞凋亡率分别为(37.8±2.1)％、(26.6±1.2)％和(15.4±0.9)％,明显高于对照组的(4.8±0.4)％,H=21.64,P＜0.001.西黄丸含药血清处理24 h后,BEL-7404细胞LC3-Ⅱ蛋白的表达水平升高且呈剂量依赖关系;同时,荧光染色激光共聚焦显微镜观察到细胞自噬体明显多于对照组.自噬抑制剂3-MA联合高、中和低剂量组西黄丸含药血清处理24 h后,BEL-7404细胞的增殖抑制率分别为(42.3±4.5)％、(25.1±3.5)％和(18.2±2.3)％,明显高于单用同剂量组含药血清的(34.2±3.6)％、(17.2±1.8)％和(9.8±1.2)％,U高=4,U中=0,U低=0,均P＜0.05;相应的,3-MA联合高、中、低剂量组西黄丸含药血清处理24 h后,BEL-7404细胞的的凋亡率分别为(54.5±3.5)％、(43.2±2.9)％和(32.8±3.7)％,明显高于单用同剂量组合药血清的(38.5±2.5)％、(23.8±1.7)％和(18.8±1.3)％,U高=0,U中=0,U低=0,P＜0.05.结论 西黄丸合药血清能抑制BEL-7404细胞增殖,诱导其发生凋亡与自噬;抑制自噬可以增强西黄丸含药血清对BEL-7404细胞的增殖抑制和凋亡诱导效应.
西黄丸、肝癌、自噬、凋亡、增殖
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R735.7(肿瘤学)
国家自然科学基金81402040;安徽高校省级自然科学研究重点项目KJ2012A163
2016-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1735-1740
