Annexin A5沉默对ERK1/2 MAPK-Bax凋亡通路影响和意义
目的 探讨结肠癌细胞株RKO中Annexin A5对ERK1/2 MAPK-Bax凋亡通路的影响.方法 慢病毒转染人结肠癌RKO细胞后进行稳定细胞株筛选;用流式凋亡和Hoechst 33258实验探究Annexin A5沉默前后的细胞株凋亡情况;采用RT-PCR法及蛋白质印迹法验证Annexin A5沉默前后ERK1/2、Bax和Bcl-2的mRNA与蛋白表达量的变化.结果 实验组相对于空白对照组Annexin A5的mRNA相对表达量从1.010±0.017下降到0.056±0.005,下降了(95.34±1.54)％,F=2 320.600,P＜0.000 1.Annexin A5沉默前后的细胞凋亡率分别为(24.87±6.18)％和(10.7±2.66)％,沉默后凋亡率较之前明显下降,t=3.57,P=0.023.Annexin A5沉默后Bax的mRNA相对表达量从1.000±0.000下降到0.732±0.034,下降了(26.79±3.41)％,F=9.884,P＜0.05;但蛋白相对表达量无明显变化,P=0.945;Bcl-2 mRNA相对表达量从1.000±0.000上升到1.592±0.085,上升了(59.17±8.49)％,F=84.026,P＜0.001;蛋白相对表达量从0.671±0.018上升到1.580±0.019上升了(135.78±8.89)％,F=2 195.872,P＜0.000 1.磷酸化后的ERK1/2蛋白相对表达量从0.917±0.062上升到1.041±0.045,上升了(13.75±5.88)％,F=6.948,P＜0.05.结论 Annexin A5本身可能影响或参与了肿瘤细胞的凋亡过程,ERK1/2 MAPK凋亡通路可能是其影响或参与机制之一.
Annexin A5、ERK1/2、Bax、Bcl-2、结肠肿瘤、转染
22
R735.35(肿瘤学)
广西自然科学基金面上项目2013GXNSFAA019153;广西高校科学技术研究重点项目2013ZD015
2015-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1440-1444
