截短性HSP110抗原肽复合物免疫小鼠的CTL活性研究
目的 观察基因工程来源的截短性热休克蛋白110(truncated heat shock protein110,tHSP110)抗原肽复合物免疫BALB/c小鼠在体外诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocyte,CTL)的活性.方法 基因工程来源的tHSP110在体外与人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2/neu)的胞外区(extracellular domain,ECD),非共价耦联方法构建tHSP110-ECD抗原肽复合物,并通过免疫共沉淀方法鉴定.分3次(每周1次)用HSP110、tHSP110、HSP110-P106-114(全长HSP110与HER2/neu ECD的一个CTL表位肽组成的复合物)、tHSP110-P106 114和HSP110-ECD复合物免疫BALB/c小鼠,末次免疫1周后,采用酶联免疫斑点(enzyme-linked immunospot,Elispot)法对T细胞分泌干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的水平进行检测,通过颗粒酶释放法检测tHSP110-ECD诱导的杀伤性T细胞的抗肿瘤效应.结果 T细胞IFN-γ分泌测定结果显示,全长HSP110组蓝色斑点数量为(17,50±3.89)个,tHSP110组为(17.75±3.54)个,HSP110-P106-114组为(72.16±4.22)个,tHSP110-P106-114组为(70.16±2.29)个,HSP110-ECD组为(90.38±5.85)个,tHSP110-ECD组为(88.38±6.14)个.tHSP110-P106-114组与tHSP110-ECD组分泌IFN-γ的小鼠脾细胞数目差异有统计学意义,P＜0.05;t HSP1 10-ECD组与HSP110-ECD组相比,差异无统计学意义,P=0.741.特异性CTL检测的结果显示,HSP110组的杀伤率为(9.63±1.67)％,tHSP110组为(9.00±1.60)％,HSP110-P10106-114组为(36.38±2.62)％,tHSP110-P106-114组为(38.50±4.37)％,HSP110-ECD组为(72.88±3.68)％,tHSP110-ECD组为(73.38±3.66)％.tHSP110-P106-114组与tHSP110-ECD组靶细胞杀伤率差异有统计学意义,P＜0.05;tHSP110-ECD组与HSP110-ECD组相比差异无统计学意义,P＞0.05.结论 tHSP110-ECD复合物作为肿瘤疫苗可刺激T淋巴细胞增殖为CTL,诱发机体的细胞毒性T细胞免疫反应,tHSP110具有同全长HSP110相同的结合大分子抗原的能力和激活CTL反应的能力.
截短性 HSP110、T 淋巴细胞、免疫应答、疫苗
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R737.9(肿瘤学)
浙江省科技厅公益技术应用研究项目2015C33106;嘉兴市科技局一般科研项目2014AY21038
2015-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1368-1372
