不同打孔条件对BGC-823中MAC30和F-actin免疫荧光检测精度的影响

摘要：

目的 探讨不同浓度和时间条件下,打孔试剂Triton X-100对胃癌细胞系BGC-823中MAC30和F-actin表达和定位精度的影响.方法 应用0.1％、0.2％或0.5％含量的打孔试剂Triton X-100,处理BGC-823细胞5、10或15 min,然后利用MAC30和F-actin抗体进行免疫荧光染色.结果 当应用0.1％Triton X-100与固定的胃癌细胞系BGC-823作用5 min,MAC30蛋白在BGC-823细胞质中高表达,F-actin染色清晰.随着打孔试剂含量从0.1％提高到0.5％,或作用时间从5 min延长到15 min,MAC30在细胞质和细胞核中表达也随之上调,尤在细胞质中高表达,而F-actin染色则开始变得模糊,直至无法分辨肌丝和伪足.结论 应用细胞免疫荧光染色揭示某蛋白与胃癌发生发展相关性研究中,应考虑不同打孔时间和含量所产生的染色结果差异,注重实验条件的选择与优化.

关键词：胃癌、免疫荧光染色技术、Triton X-100、MAC30、鬼笔环肽

所属期刊栏目：22

分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：沈阳市科学技术计划 F15-139-9-11

在线出版日期：2015-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1363-1367,1372