增强PIAS3表达对CHG-5细胞生物学效应的影响
目的 探讨增强人胶质瘤CHG-5细胞内的活化STAT3抑制蛋白(protein inhibitor of activated STAT3,PIAS3)表达对CHG-5细胞增殖及凋亡等生物学效应的影响.方法 构建PIAS3真核表达载体pEGFP-N1-PIAS3,使用脂质体法瞬时转染人CHG-5胶质瘤细胞,同时设置空白对照组和阴性对照组,转染48 h后用RT-PCR、蛋白质印迹法和免疫组化法分别在核酸和蛋白水平检测目的蛋白表达,采用流式细胞技术检测转染后的胶质瘤细胞凋亡和细胞增殖变化.结果 转染后的CHG-5细胞可见PIAS3绿色荧光蛋白表达,显微镜观察发现细胞形态改变,坏死细胞增多.转染组PIAS3 mRNA的积分密度值为523 414.50±34 502.89,与空白对照组的135 668.00±6 693.66和阴性对照组的154 511.67±8 266.89相比,转染组PIAS3 mRNA表达增强,x2=13.053,P=0.01.转染组PIAS3蛋白的积分密度值为30.13±3.76,与空白对照组的13.83±0.77和阴性对照组的15.02±0.87比较,CHG-5细胞转染PIAS3基因后,PIAS3蛋白表达增强,x2=14.193,P=0.001.提示转染后PIAS3 mRNA和蛋白表达增加.转染组的早期细胞凋亡率为(12.5±1.9)％,较空白对照组的(6.4土1.1)％和阴性对照组的(5.4±1.8)％升高,x2 =7.407,P=0.005;转染组的活细胞率为(86.9±2.2)％,较空白对照组的(92.1±1.2)％和阴性对照组的(93.1±2.0)％降低,x2=4.775,P=0.019.转染组S期细胞百分率为(35.2±4.2)％,高于空白对照组的(24.5士5.1)％和阴性对照组的(23.0±3.7)％,x2=8.179,P=0.003;转染组G2期细胞百分率为(10.7±5.4)％,高于空白对照组的(21.3±4.0)％和阴性对照组的(27.8±5.2)％,x2=17.121,P＜0.01.结论 外源性增强PIAS3表达,引起CHG-5胶质瘤细胞生长缓慢,出现S期阻滞,并促进细胞凋亡发生.
PIAS3、胶质瘤细胞、增殖、细胞周期、凋亡
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R730.264(肿瘤学)
国家自然科学基金30973074
2015-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1341-1346
