BMK1表达对胶质瘤细胞U87侵袭能力影响机制探讨
目的 探讨大丝裂原活化蛋白激酶1 (big mitogen-activated protein kinase 1,BMK1)表达对U87细胞侵袭能力的影响及作用机制.方法 应用siRNA干扰技术转染U87细胞株,并采用蛋白质印迹法检测U87细胞中BMK1表达及转染后BMK1表达情况.体外癌细胞侵袭实验检测U87细胞转染后侵袭能力变化.BMK1下降后,蛋白质印迹法检测间叶细胞特异性标记蛋白N-cadherin、T-cadherin、Vimentin和转录因子Snail、Slug、Twist1、Zeb1的表达.结果 蛋白质印迹法检测结果显示,U87细胞中BMK1相对表达量为1.0±0.21,SCR/U87细胞中BMK1相对表达量为1.1±0.18,SiBMK1/U细胞中BMK1相对表达量为0.45±0.12,差异有统计学意义,F=12.129,P=0.008.体外癌细胞侵袭实验显示,SiBMK1/U87实验组穿透Matrigel膜基质的细胞数为106±18,SCR/U87对照组为61±15,U87对照组为62±14,差异有统计学意义,F=7.977,P=0.020;U87对照组与SCR/U87对照组差异无统计学意义,P=0.941;而SiBMK1/U87实验组穿透基膜的细胞数明显多于U87对照组(P=0.014)和SCR/U87对照组(P=0.013),差异有统计学意义.蛋白质印迹法结果显示,SCR/U87和SiBMK1 /U87细胞中N-cadherin相对表达量分别为1.0±0.13和3.8±0.31,t=-14.427,P＜0.001;Vimentin相对表达量分别为1.5±0.16和3.9±0.22,t=-15.281,P＜0.001;T-cadherin相对表达量分别为4.5±0.12和1.3±0.14,t=30.059,P＜0.001.SCR/U87和SiBMK1/U87细胞中Twist1蛋白相对表达量分别为0.75±0.14和2.3±0.22,t=-10.295,P=0.001,差异有统计学意义.表明BMK1表达影响Twist1的表达.结论 BMK1与U87细胞侵袭性显著相关,其侵袭性的调控是通过间叶转化(mesenchymal transition,MT)实现的.
U87细胞、siRNA干扰、大丝裂原活化蛋白激酶1、间叶转化、侵袭
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R734.41(肿瘤学)
国家自然科学基金81072068;山东省中青年科学家科研奖励博士基金2010BSB14050
2014-12-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1667-1670
