Wnt/β-catenin信号转导通路与肺腺癌顺铂耐药作用机制研究
目的:探讨Wnt/β-catenin信号转导通路在肺腺癌顺铂耐药中的分子作用机制.方法:体外常规培养人肺腺癌A549细胞和其顺铂耐药A549/DDP细胞,取对数生长期的细胞用于实验.采用MTT法检测A549和A549/DDP细胞对顺铂的IC50;采用Annexin Ⅴ/PI法和Hoechst 33342染色法检测顺铂处理后2种细胞的凋亡率;采用蛋白质印迹法检测2种细胞中β-catenin和Survivin的表达;采用siRNA干扰沉默β-catenin的表达,检测A549/DDP细胞的IC50值、细胞凋亡率及β-catenin和Survivin的表达.结果:顺铂对A549/DDP细胞的IC50值为(28.984±1.404) μmol/L高于A549细胞的(5.888±0.338) μmol/L,t=27.696,P＜0.001;20 μmol/L顺铂诱导A549/DDP细胞凋亡率为(21.75±0.96)％,显著低于A549细胞的(39.38±0.88)％,t=23.474,P＜0.001.A549/DDP细胞中β-catenin蛋白的表达为1.890±0.060,显著高于A549细胞的1.063±0.035,t=20.595,P＜0.001;在A549/DDP细胞中Survivin蛋白表达量为1.107±0.061,明显高于A549细胞的0.503±0.025,t=15.814,P＜0.001.RNAi技术沉默β-catenin蛋白耐药性(14.615±0.939) μmol/L,显著低于未沉默β catenin A549/DDP细胞的(28.984±1.404) μmol/L,t=14.732,P＜0.001;RNAi技术沉默β catenin蛋白细胞凋亡率为(37.57±0.64)％,显著高于未沉默β-catenin A549/DDP细胞的(21.75±0.96)％,t=23.699,P＜0.001;RNAi技术沉默β-catenin蛋白下游靶基因Survivin蛋白的表达为0.527±0.065,显著低于A549/DDP组的1.027±0.025和瞬时转染阴性对照siRNA组的1.033±0.040,F=116.944,P＜0.001.结论:抑制Wnt/β-catenin信号转导通路的活性可以降低A549/DDP细胞对顺铂的耐药性.
β-连环蛋白、Survivin、癌、非小细胞肺、顺铂、耐药
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R734.2(肿瘤学)
2014-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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