BCSC-1基因异位表达对MDA-MB-231侵袭能力影响及其机制探讨

摘要：

目的:利用已构建的乳腺癌候选抑制蛋白-1(breast cancer suppressor candidate 1,BCSC-1)基因真核表达质粒转染人乳腺癌细胞株MDA-MB231,观察BCSC-1基因异位表达对MDA-MP-231细胞体外侵袭能力的影响,初步探讨其影响机制.方法:利用脂质体将pcDNA3.1/v5-HisP-BCSC-1和空质粒pcDNA3.1/v5-HisB转染野生型MDA-MB-231细胞,以转染空质粒pcDNA3.1/v5-HisB的MDA-MB-231细胞为对照组,野生型MDA-MB-231细胞为空白对照组,转染后经G418加压筛选获得稳定BCSC-1表达细胞株.细胞划痕和Transwell细胞侵袭实验分析转染前后细胞侵袭能力的改变,实时荧光定量PCR分析转染前后基因的变化,细胞免疫组化分析转染前后BCSC-1以及细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)的变化.结果:转染后成功获得BCSC-1基因异位高表达稳定细胞株.细胞划痕实验显示,转基因组细胞平均迁移距离为(105.33±13.61) μm,较对照组(225±18.02) μm和对照组(236±16.46) μm明显降低,F=60.50,P=0.002.细胞侵袭实验显示,转基因组24 h平均穿膜细胞数为34.67±2.52,较空白对照组56.66±2.08和对照组63.33±4.16明显降低,F=72.33,P=0.005.实时定量荧光PCR结果显示,转基因组BCSC-1表达水平为32.66±2.51,较对照组2.33±1.52和空白对照组明显升高,F=333.12,P=0.001;转基因组ICAM-1表达水平为28.67±3.79,较对照组3.33±1.53和空白对照组明显升高,F=127.14,P=0.003.细胞免疫组化结果显示,转染后BCSC-1以及ICAM-1表达水平明显增高.结论:BCSC-1基因的异位表达对MDA-MB-231细胞体外转移和侵袭能力有明显的抑制作用,这种抑制作用可能与ICAM-1表达增高有关.

关键词：乳腺肿瘤、BCSC-1基因、基因表达、MDA-MB-231细胞

所属期刊栏目：21

分类号：R737.9(肿瘤学)

资助基金：山东省自然科学基金2009CM019;山东省教育厅资助项目2007WZ30;潍坊市卫生局科研计划2012065

在线出版日期：2014-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：415-419