siRNA介导RRM2沉默对卵巢癌细胞顺铂敏感性影响研究
万方数据知识服务平台
应用市场
我的应用
会员HOT
万方期刊
×

点击收藏,不怕下次找不到~

@万方数据
会员HOT

期刊专题

10.3969/j.issn.1673-5269.2014.04.008

siRNA介导RRM2沉默对卵巢癌细胞顺铂敏感性影响研究

引用
目的:探讨小干扰RNA(siRNA)介导的核糖核苷酸小亚基M2 (ribonucleotide reductase M2,RRM2)沉默对顺铂(DDP)诱导的卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP敏感性的影响.方法:采用间歇浓度梯度递增法诱导SKOV3/DDP;将RRM2基因的特异性siRNA转染SKOV3/DDP细胞,另设空白组和SKOV3/DDP-RRM2-neg(阴性组)做为对照;荧光PCR技术和蛋白质印迹法分别检测转染后备组细胞中RRM2基因mRNA和蛋白表达;MTT法检测RNAi对SK-OV3/DDP细胞药物敏感性的影响.结果:成功诱导出卵巢癌DDP耐药细胞株SKOV3/DDP细胞,其耐药系数达到3.6,属低度耐药,但对吉西他滨(Gem)仍敏感.DDP对干扰组、阴性组和空白组细胞48 h的IC50分别为(3.09±0.11)、(9.88±0.37)和(10.35±0.03) μg/mL,3者间差异有统计学意义,P<0.001.干扰组细胞对DDP的敏感度提高了约3倍,其RF为3.3.SKOV3/DDP-RRM2-RNAi 667(Ⅰ)组RRM2 mRNA水平下调为74.1%,P=0.010;SKOV3/DDP-RRM2-RNAi480(Ⅱ)组RRM2 mRNA水平下调为55.9%,P=0.016; SKOV3/DDP-RRM2-RNAi1179(Ⅲ)组RRM2mRNA水平下调为43.1%,P=0.001.其中,以转染Ⅰ组基因沉默率(82.33%)最高,P<0.001;阴性组(0.008 6%)与空白组(0.008 2%)比较,差异无统计学意义,P=0.133.转染RRM2的不同靶序列72h后RRM2蛋白的表达量最低,Ⅰ组为0.062±0.006,Ⅱ组为0.314±0.002,Ⅲ组为0.123±0.002,与阴性组(0.715±0.034)和空白组(0.516±0.040)比较均明显降低,但以转染Ⅰ组细胞的蛋白相对表达量下降最明显,F=658.6,P=0.003 3.Gem和DDP联合作用72 h时,转染组细胞凋亡率为(96±3.0)%,与其各组比较,差异均有统计学意义,P值均<0.001.结论:通过RNAi技术可有效抑制RRM2基因在卵巢癌中的转录和翻译水平,增加DDP耐药细胞的药物敏感性,并促进DDP诱导的卵巢癌耐药细胞凋亡,在一定程度上逆转DDP耐药性;RNAi技术联合Gem及DDP作用可有效提高卵巢癌DDP耐药细胞的凋亡率,有望成为铂类耐药的卵巢癌晚期患者一线治疗方案.

卵巢肿瘤、基因沉默、RNA干扰、耐药逆转、核糖核苷酸小亚基M2

21

R737.31(肿瘤学)

青岛市科技计划基础研究项目11-2-4-2-10-jch

2014-04-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共7页

273-279

相关文献
评论
暂无封面信息
查看本期封面目录

中华肿瘤防治杂志

1673-5269

11-5456/R

21

2014,21(4)

相关作者
相关机构

专业内容知识聚合服务平台

国家重点研发计划“现代服务业共性关键技术研发及应用示范”重点专项“4.8专业内容知识聚合服务技术研发与创新服务示范”

国家重点研发计划资助 课题编号:2019YFB1406304
National Key R&D Program of China Grant No. 2019YFB1406304

©天津万方数据有限公司 津ICP备20003920号-1

信息网络传播视听节目许可证 许可证号:0108284

网络出版服务许可证:(总)网出证(京)字096号

违法和不良信息举报电话:4000115888    举报邮箱:problem@wanfangdata.com.cn

举报专区:https://www.12377.cn/

客服邮箱:op@wanfangdata.com.cn