10.3969/j.issn.1673-5269.2013.19.011
XAF1基因对顺铂诱导肺腺癌A549细胞凋亡作用的研究
目的:通过顺铂诱导人肺腺癌细胞A549的凋亡,研究X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(X-linked inhibitor of apoptosis protein associated factor-1,XAF1)基因在A549细胞中的表达情况,初步探讨该基因在凋亡中的作用.方法:采用4 μg/mL浓度的顺铂处理A549细胞,MTT法检测细胞的增殖抑制率;AnnexinV/7-AAD检测A549细胞凋亡情况;RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测A549凋亡后XAF1 mRNA和蛋白的表达;Caspase-3试剂盒检测A549细胞凋亡后Caspase-3的活性.结果:用4μg/mL浓度顺铂处理A549细胞2、12和24 h后,A549细胞增殖抑制率分别为(3.40±0.65)%、(8.31±0.73)%和(14.72±0.24)%,与对照组(1.03±0.28)%相比均明显增高,P值分别为0.004、0.000和0.000,细胞增殖抑制率随时间增加而增强;A549细胞凋亡率分别为(4.35±0.95)%、(9.69±2.60)%和(22.35±1.24)%,与对照组(1.39±0.21)%相比均明显增加,P值分别为0.006、0.005和0.000,细胞凋亡率随顺铂作用时间延长而增加;实验组XAF1 mRNA表达水平分别为(0.199±0.029)、(0.654±0.093)和(1.216±0.101),对照组为(0.091±0.020),XAF1 mRNA表达水平随作用时间的延长呈增加趋势,P值分别为0.006、0.001和0.000;实验组XAF1蛋白表达水平分别为(0.322±0.041)、(0.508±0.014)和(0.901±0.014),对照组为(0.124±0.007),XAF1蛋白表达水平随作用时间的延长呈增加趋势,P值分别为0.001、0.000和0.000;Caspase-3活性(A405 nm)分别为(34.745±3.781)、(69.524±3.096)和(94.787±5.429),对照组为(21.914±1.962),Caspase-3活性随顺铂作用时间的延长而增加.结论:顺铂诱导A549细胞凋亡可以引起XAF1表达增加,且随细胞凋亡水平的提高而增加,提示XAF1可能参与顺铂诱导人肺腺癌A549细胞的凋亡过程.
肺肿瘤、顺铂、A549细胞、X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1、细胞凋亡、印迹法,蛋白质
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R734.2(肿瘤学)
2013-11-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1499-1502,1512