免疫磁珠法原代分离培养人子宫内膜癌微血管内皮细胞及鉴定

摘要：

目的:建立人子宫内膜癌(EC)微血管内皮细胞的原代分离培养方法并研究其体外免疫组化特征.方法:采用免疫磁珠法结合胶原酶消化法及筛网过滤法分离纯化EC微血管内皮细胞,采用含有20％胎牛血清的M199培养.通过光镜、细胞免疫荧光技术对所获得的微血管内皮细胞进行鉴定,流式细胞仪检测微血管内皮细胞的纯度.微血管内皮细胞的生长曲线通过MTT法测定.结果:微血管内皮细胞台盼蓝拒染率为90％,纯度95％,并能连续传代.原代细胞7～9 d完全融合,传代培养后5～6 d可传代1次.细胞单层生长,融合后呈铺路石样具有接触抑制现象.免疫荧光证实,传代细胞表达内皮细胞特异性vWF因子及细胞间黏附蛋白CD31.经MTT法测定得到的微血管内皮细胞体外生长曲线呈“S”型.结论:成功建立了人EC微血管内皮细胞的分离培养方法,所获得的细胞可用于EC的相关研究,为探讨EC的临床治疗方法提供了新的平台.

关键词：子宫内膜肿瘤、微血管内皮细胞、细胞培养技术、免疫磁珠

所属期刊栏目：19

分类号：R737.3(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30901713

在线出版日期：2012-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：561-565