EGFRvⅢ单克隆抗体研制与鉴定

摘要：

目的:制备针对EGFRvⅢ的单克隆抗体,以期待其对消化道肿瘤的靶向治疗.方法:通过人工合成EGFRvⅢ与KLH连接,免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备鼠源性单克隆抗体细胞株,经腹水生产抗体,并对抗体进行纯化和相关性质鉴定.结果:合成EGFRvⅢ的基因缺失融合区的相应14肽,短肽与蛋白载体KLH连接作为抗原,免疫Balb/c小鼠.制备针对表达EGFRvⅢ肿瘤而对正常组织无破坏作用的的单克隆抗体.通过常规免疫程序获得高效价(1∶128 000)抗血清的免疫小鼠后,进行细胞融合,制备杂交瘤单克隆抗体细胞.应用ELISA检测的方法筛选鉴定能分泌EGFRvⅢ抗体的杂交瘤细胞株,经亚克隆获得5株鼠源性成系抗体阳性细胞株.阳性细胞株经扩大培养,注射于小鼠腹腔以大量制备抗体.抗体型别鉴定为IgG2a,并对抗体效价及其相对亲合力进行测定.腹水效价达1∶128 000,亲和力最高达9.8×10-9 mol/L.用表达的正常EGFR配体结合区蛋白检测自制抗体的特异性,结果显示抗体不与正常EGFR配体结合区蛋白结合.结论:成功制备了抗鼠EGFRvⅢ单克隆抗体,为后续抗肿瘤的靶向治疗奠定基础.

关键词：表皮生长因子受体、EGFRvⅢ单克隆抗体、肿瘤

所属期刊栏目：19

分类号：R73-3(肿瘤学)

在线出版日期：2012-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：192-196