靶向VEGF发夹状RNA对宫颈癌HeLa细胞抑制作用的研究

摘要：

目的:运用RNAi技术下调血管内皮生长因子(VEGF)在HeLa细胞中的表达,观察其对肿瘤细胞凋亡的影响,为人宫颈癌治疗提供理论依据.方法:设计并构建针对VEGF的携带绿色荧光蛋白( GFP)发夹状RNA (shRNA)质粒表达载体(PGPU6/GFP/Neo-shRNA),脂质体法转染HeLa细胞；荧光显微镜观察GFP的表达,并计算转染效率；RT-PCR检测HeLa细胞VEGF的表达,筛选出靶序列；再用流式细胞仪法检测细胞凋亡.结果:构建的PGPU6/GFP/Neo载体成功转入HeLa细胞；转染48 h后,HeLa-shVEGF1组HeLa细胞VEGFmRNA表达的抑制率为75.0％；与HeLa组和HeLa-shNC组相比,HeLa-shVEGF1组HeLa细胞凋亡率明显增加,P＜0.01.结论:本研究构建的PGPU6-shRNA表达载体携带GFP便于观察细胞的转染情况,且不影响U6启动子的转录,同时有效沉默了VEGF基因,明显增加HeLa细胞的凋亡,为未来肿瘤的治疗提供新途径.

关键词：血管内皮生长因子、RNA干扰、发夹状RNA、HeLa细胞、凋亡

所属期刊栏目：18

分类号：R735.36(肿瘤学)

资助基金：哈尔滨市科技攻关计划项目2005AA9CS116-10

在线出版日期：2011-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1235-1238,1246