RNAi双向沉默Survivin和XIAP基因对卵巢癌细胞A2780-cp凋亡及顺铂敏感性影响的观察
目的:运用RNA干扰技术双向沉默卵巢癌耐顺铂细胞株A2780-cp的Survivin和XIAP基因后,观察细胞的凋亡及对顺铂敏感性的影响.方法:通过脂质体介导将化学合成的Survivin-siRNA 和XIAP-soiRNA,共同或单独转染到卵巢癌耐药细胞株A2780-cp中,未转染组作为阴性对照;流式细胞术(FCM)检测转染细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测Survivin和XIAP基因的蛋白表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测转染后细胞对顺铂的敏感性及其增殖情况.结果:转染48 h后,单独和共同转染组与对照组相比可见明显的细胞凋亡形态学变化,共转染组凋亡率为26.98%,高于单转Survin-siRNA组(12.82%)和单转XIAP-siRNA 组(11.18%).蛋白质印迹法结果显示,共转染组Survivin和XIAP的蛋白抑制率分别为71.11%和76.81%,单转染组Survivin和XIAP蛋白抑制率分别为75.00%和82.48%,与其他对照组比较差异有统计学意义,P<0.05;MTT结果显示,转染后细胞对顺铂敏感性增强,共转染组细胞生长活力下降明显,顺铂的IG50值为(0.10±0.01)μg/mL,与单转染组及脂质体转染组比较差异有统计学意义,P<0.05.结论:同时干扰Survivin基因和XIAP基因能更好的抑制卵巢癌耐药细胞株A2780-cp的生长,降低其耐药性,促进其凋亡.
卵巢肿瘤、RNA干扰、基因、survivin、XIAP、流式细胞术、印迹法、蛋白质
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R737.31(肿瘤学)
贵州省自然科学基金黔科合J字[2007]2128号
2011-10-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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