LC3B真核表达载体构建及其在293细胞的表达

摘要：

目的:构建重组人LC3B的真核表达载体,建立稳定表达EGFP、EGFP-LC3B的293细胞系.方法:基因克隆方法构建pcDNA3-N-EGFP-LC3B的真核表达载体,应用脂质体介导的转染技术将该重组质粒及pcDNA3-N-EGFP空载体质粒导入293细胞,用G418筛选稳定表达的细胞系.293细胞中EGFP、EGFP-LC3B的表达用倒置荧光显微镜方法检测.结果:成功扩增LC3B基因大小片段,克降测序结果与NCBI收录的LC3B序列完全一致.获得转染并经G418反复筛选稳定表达EGFP、EGFP-LC3B的293细胞系.结论:成功建立EGFP、EGFP-LC3B稳定表达的293细胞系,并且具有正常的生物学功能,从而为后续研究提供有用的细胞研究模型.

关键词：微管相关蛋白质类、基因表达、细胞系、肿瘤、遗传载体、转染

所属期刊栏目：17

分类号：R73-3(肿瘤学)

在线出版日期：2011-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1537-1540