HLA-A2型人外周血MAGE-A10特异性T细胞的体外激发及功能检测

摘要：

目的:探讨体外激发HLA-A2型人外周血单个核细胞(PBMC)中的MAGE-A10<,(254-262)>特异性T淋巴细胞及其功能检测方法.方法:分别采用肽段MAGE-A-10<,(254-262)>直接刺激PBMC的Bulk Culture法和自体DC负载肽段MAGE～A10<,(254-262)>刺激CD3<'+>CD8<'+>法,均经3次刺激进行体外扩增tetramer-MAGE-A10<,(254-262)>阳性T细胞.以人流感病毒肽段flu-matrix<,(58-66)>为阳性对照.Intracellular staining法检测其针对MAGE-A10<,(254-262)>的穿孔素、颗粒酶B的分泌能力.结果:HLA-A2型PBMC用BuckCulture或DC负载肽段刺激CD3<'+>CD8<'+>法培养,激发的tetramer-flu阳性T细胞率均>10%,DC法激发的tetramer-flu阳性T细胞率显著高于Buck Culture,t=9.79,P<0.01.Bulk Culture法得到的阳性T细胞率分别为0.01%和0.02%,DC法则分别是0.05%和0.12%.Sorting得到的tetram-er-MAGE-A10<,(254-262)>阳性T细胞,效靶比为10:1时其特异性杀伤为46%,细胞针对MAGE-A10<,(254-262)>分泌穿孔素、颗粒酶B的百分率分别为39%和87%.结论:从捐献的人血细胞中用自体DC负载肽段刺激CD3<'+>CD8<'+>法激发tetramer阳性T细胞的效率优于Bulk Culture法.

关键词：抗原特异性T细胞、MAGE-A10(254-262)四聚体、功能试验

所属期刊栏目：15

分类号：R73-3(肿瘤学)

资助基金：Ludwig Institute for Cancer Research,The Cancer Research Institute,The Swiss National Science Foundation:广东省自然科学基金031722

在线出版日期：2009-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1647-1650,1673