载体介导的RNA干扰技术抑制肝癌耐药细胞MDR1表达的研究

摘要：

目的:构建含多药耐药基因MDR1的短发夹状RNA(short hairpinRNA,shRNA)表达质粒,观察对肝癌耐药细胞Bel-7402/R的MDR1 mRNA的抑制作用.方法:利用分子克隆技术,将含MDR1的双链DNA,与经双酶切后的载体PGE-1连接,构建pshRNA MDR1重组质粒,在脂质体的介导下转染肝癌耐药细胞株Bel-7402/R;RT-PCR分析MDR1 mRNA的表达,MTT法检测细胞对药物的敏感性,流式细胞仪检测细胞内罗丹明123(Rh123)的潴留和P-gp的表达.结果:PCR和DNA测序证实了表达质粒构建成功,并能明显地抑制MDR1 mRNA的表达;对盐酸表柔比星和顺铂的半数抑制浓度IC50明显降低,P＜0.05;P-gp的表达阳性率降低了57.3%;细胞内Rh123的浓度显著增高,P＜0.05.结论:构建的pshRNA-MDR1表达质粒能有效地降低肝癌耐药细胞MDR1 mRNA和P-gp的表达.

关键词：基因、MDR、基因表达、RNA、肝肿瘤

所属期刊栏目：11

分类号：R737.9(肿瘤学)

资助基金：湖北省卫生厅科研项目JX1B116;湖北省教育厅科研项目2004D006

在线出版日期：2004-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1158-1162