sFv及重组人TNF-α融合基因表达载体的构建及瞬时表达

摘要：

目的:构建pEGFP-sFv-rhTNF-α表达载体,观察其在成骨肉瘤细胞9901中的瞬时表达.方法:应用PCR方法对各目的基因进行扩增并经测序载体pGEM-T-Easy测序后,以逆转录病毒载体pLXSN中的多克隆位点将二者融合为融合基因sFv-rhTNF-α,并将其亚克隆至pEGFP-N3的EcoRI和BamHI位点间,成功构建表达载体pEGFP-sFv-rhTNF-α,并在该载体转染人成骨肉瘤细胞9901后观察融合蛋白表达情况.结果:酶切鉴定证实sFv-rhTNF-α融合基因片段已克隆到pEGFP-N3的EcoRI和BamHI位点间,并在转染人成骨肉瘤细胞9901中观察到sFv-rhTNF-α融合基因及绿色荧光蛋白的表达.结论:pEGFP-sFv-rhTNF-α表达载体便于观察转染细胞中sFv-rhTNF-α融合蛋白的表达情况及蛋白定位,为单链抗体基因联合细胞因子基因疗法提供有利条件.

关键词：单链抗体基因、肿瘤坏死因子-α、融合基因、表达

所属期刊栏目：9

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：131-134