先天性巨结肠乳鼠肠组织中PI3K/AKT/eNOS信号通路相关标志物的表达及意义

摘要：

目的:建立乳鼠模型,模拟人类先天性巨结肠(HD)的发生,观察其结肠组织中p-Akt蛋白、 NO及eNOS的表达情况,并探讨其意义.方法:本研究分为正常组、对照组和实验1、 2、 3组,每组3窝,每窝10只,共计15窝,所选对象为6～7日龄SD乳鼠,实验组以0.1%苯扎氯铵(BAC)处理降结肠15 min、对照组则用生理盐水代替,正常组不做任何处理.实验2、 3组饲养满6周后,开始分别予每天腹腔注射10 mg/mL的LY294002 (100 mg/kg)和50 mg/mL的L-NAME (10 mg/kg),直至7周整.术后的第1、 3、 5、 6和7周行乳鼠降结肠组织解剖,观察结肠大体形态,运用Western blotting法检测各组乳鼠结肠组织p-Akt蛋白表达水平,结肠组织中NO和eNOS含量检测采用传统的ELIS A试剂盒法.结果:①术后观察,实验组5周开始出现排便减少,直至7周发生不同程度的腹胀、神萎及消瘦,较对照组相比,粪便颗粒变大且干燥,处死后,解剖BAC处理段结肠,可见肠道蠕动变差或无蠕动,肠管痉挛、狭窄,近端肠管扩张,并可见肠内容物潴留.②术后1、 3、 5、 6和7周,随时间延长,实验1组结肠组织中p-Akt呈逐渐下降趋势,实验2组7周(LY294002组) p-Akt表达量较实验1组7周有所减少,而实验3组7周p-Akt (L-NAME组)表达量较实验1组7周增加.③实验1组术后结肠组织中NO和eNOS含量,在第1、 3、 5、 6和7周呈逐渐增加趋势.结论:本实验模型成功模拟了人类先天性巨结肠的发生,通过本次实验,我们推测PI3K/AKT/eNOS信号通路很有可能参与了乳鼠HD的发生,为进一步研究HD的病因及相关分子生物学机制奠定理论基础.

关键词：先天性巨结肠、实验动物模型、p-Akt蛋白、一氧化氮、内皮型一氧化氮合酶

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在线出版日期：2019-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：17-21