EPO预处理骨髓间充质干细胞预防大鼠肾移植术后急性排斥反应的初步研究

摘要：

目的 探讨促红细胞生成素(EPO)预处理骨髓间充质干细胞(BMSC)用于预防大鼠肾移植术后急性排斥反应的作用.方法 将BMSC分为5组,分别为对照组(不含EPO)、A组(EPO终浓度10 IU/mL)、B组(EPO终浓度100 IU/mL)、C组(EPO终浓度500 IU/mL)和D组(EPO终浓度1 000 IU/mL),每组细胞培养24 h和48 h,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法测定BMSC的细胞增殖率.将BMSC分为2组,分别为BMSC组(不含EPO)和EPO-BMSC组(EPO终浓度500 IU/mL),每组细胞培养48 h后,采用蛋白印迹(Western blot)法检测各组BMSC表面趋化因子受体(CXCR)4的蛋白表达水平.以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体,建立肾移植急性排斥反应模型后,将受体鼠随机分为4组,每组6只,分别为对照组(未进行任何干预)、EPO组(术后立即经尾静脉注射1 mL含有500 IU的EPO溶液)、BMSC组(术后立即经尾静脉注射1 mL的1×106/mL BMSC细胞液)、EPO-BMSC组(经尾静脉注射1 mL 500 IU/mL EPO体外培养的含有1×106/mL BMSC细胞液),采用血清肌酐(Scr)试剂盒测定血标本中Scr水平,采用Western blot法检测移植肾组织中干扰素(IFN)-γ和白细胞介素(IL)-4的蛋白表达水平.结果 培养 24 h,各组BMSC增殖率比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05).培养48 h,与对照组比较,C组(EPO终浓度500 IU/mL)的BMSC增殖率较高,差异有统计学意义(P<0.05).与BMSC组比较,EPO-BMSC组BMSC表面CXCR4的蛋白表达水平更高(P<0.05).肾移植术后1 d,各组受体鼠的Scr水平比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05);术后5 d,与对照组比较,EPO组、BMSC组和EPO-BMSC组受体鼠的Scr水平均明显降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05),且EPO-BMSC组受体鼠的Scr水平低于EPO组、BMSC组,差异均有统计学意义(均为P<0.05).术后1 d和术后5 d,各组受体鼠移植肾组织中IL-4的蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05).术后1 d,与对照组比较,EPO组、BMSC组及EPO-BMSC组受体鼠移植肾组织中IFN-γ蛋白表达水平和IFN-γ/IL-4均有不同程度降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05).术后5 d,与对照组比较,EPO组、BMSC组和EPO-BMSC组中IFN-γ蛋白表达水平和IFN-γ/IL-4均有不同程度降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05),其中EPO-BMSC组中IFN-γ蛋白表达水平和IFN-γ/IL-4均低于EPO组和BMSC组,差异均有统计学意义(均为P<0.05).结论 EPO预处理BMSC可预防肾移植术后急性排斥反应,保护移植肾功能.

关键词：骨髓间充质干细胞、促红细胞生成素(EPO)、肾移植、急性排斥反应、白细胞介素、干扰素、血清肌酐

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分类号：R617(外科手术学)

资助基金：广东省重大科技专项2015B020226005;广东省省级科技计划项目2016A020220014

在线出版日期：2018-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：283-289