10.3969/j.issn.1006-5571.2021.05.001
下调Lgr5表达对结肠癌细胞上皮-间质转化及血管生成相关因子的影响
目的 观察下调G-蛋白偶联受体5(Lgr5)基因表达对结肠癌(Colon cancer,CC)细胞侵袭和迁移及上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)和血管生成相关因子的影响.方法 检测正常肠黏膜组织与结肠癌组织中Lgr5的表达差异;以正常肠黏膜细胞NCM460作为对照组,采用RT-PCR法和Western blot法从多种CC细胞株(HT-29、SW620、LoVo)中筛选出Lgr5相对表达量最高的肿瘤细胞株;下调LoVo细胞中Lgr5表达,将实验分为对照组(只转染Lip 2000)、si-NC组(转染Lip2000和无关序列)和si-Lgr5组(转染Lip2000和si-Lgr5序列),Tran-swell小室检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力;Western Blot法检测EMT相关蛋白波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达情况;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor,BFGF)的含量.结果 与正常肠黏膜组织相比,Lgr5在结肠癌组织中表达升高(P<0.001);LoVo细胞中Lgr5表达量较NCM460细胞和其他CC细胞株(HT-29,SW620)高;与对照组比较,si-Lgr5组细胞侵袭能力和迁移能力被抑制(P<0.05),N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低,E-cadherin表达升高,VEGF和bFGF含量降低(P<0.05).结论 下调Lgr5表达,能够抑制LoVo细胞侵袭、迁移,其机制可能与抑制EMT和血管生成有关.
结肠癌;G-蛋白偶联受体5;上皮间质转化;侵袭迁移;血管生成
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R735.3+5(肿瘤学)
2021-10-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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