Lowrry法测定蛋白浓度的最佳波长选择

摘要：

针对Lowrry法中检测波长、Folin A试剂在已有检测方法中各不相同的情况,分别考察酪氨酸标准曲线和牛血清白蛋白(BSA)标准曲线在不同波长下斜率、截距和R2,以优化最佳检测波长.结果表明:在酪氨酸浓度范围0～100μg?mL-1的宽浓度区域内,Folin A法的最佳测定波长在540～600 nm均保持良好线性;若碳酸钠代替Folin A,其最佳测定波长为660～665 nm.酪氨酸浓度在40μg?mL-1时,该方法的最佳测定波长为750 nm.碳酸钠法不适于含有巯基乙醇、半胱氨酸盐酸盐和EDTA等激活剂样品中蛋白浓度的测定.在Folin A法中,BSA的最佳检测波长为555 nm,而在低浓度范围(0～0.2 mg?mL-1),其R2在540～631 nm区域均保持0.9999以上,以630 nm为例,其线性方程为y=2.4913x+0.0009(R2=0.9999).BSA的氨基酸组成中并非只有酪氨酸可与Folin试剂反应,因此,波长选择更应取决于待测蛋白质样品的性质.

关键词：蛋白、酪氨酸、波长、测定、Lowrry法

所属期刊栏目：42

分类号：Q819(生物工程学(生物技术))

资助基金：山东省重点研发计划项目;山东省自然科学基金项目;青岛市科技民生计划项目

在线出版日期：2021-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：30-36