基于核酸外切酶Ⅲ降解原理荧光检测乙肝病毒HBV

摘要：

利用核酸外切酶Ⅲ降解杂交的DNA链,将荧光素修饰的DNA探针释放到溶液中,通过测定溶液的荧光强度来测定乙肝病毒(HBV)的浓度.考察了缓冲溶液的种类、pH值、反应时间等对反应体系荧光强度的影响,确定了最佳反应条件:最佳缓冲溶液为TT缓冲溶液(pH 8.0,250 mmol·L-1 Tris-HCl,体积分数0.1%Tween 20),缓冲溶液的最佳pH值为9.0,生物素与亲和素最佳结合时间为25 min,DNA的最佳杂交时间为20 min,酶反应最佳时间为1.1 h.在最佳反应条件下,随着HBV浓度的增加,体系的荧光强度明显增强.该方法测定HBV的线性范围为0.5～5.0 pmol·L-1,检测限为0.335 pmol·L-1.

关键词：HBV、核酸外切酶Ⅲ、荧光光谱

所属期刊栏目：31

分类号：O657.32(分析化学)

资助基金：青岛科技大学博士启动基金项目0022149

在线出版日期：2011-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：579-582