10.3969/j.issn.1672-6987.2008.02.007
GABAB受体蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及复性
在大肠杆菌中培养含有pET28c质粒的BL(DE3),1mmol·L-1IPTG诱导表达,收集包涵体蛋白,对其进行初步洗涤纯化,然后用8 mol·L-1尿素溶解,在变性条件下(8 mol·L-1尿素)经镍-次氮基三乙酸(Ni-NTA)柱进行亲和层析纯化,得到的电泳纯的蛋白,纯度可达95%以上.采用柱上复性的方法对包涵体蛋白进行复性,依次以含有6,5,4,3,2,1,0 mol·L-1尿素的Refolding buffer缓冲液洗柱,此方法可实现蛋白的同时纯化及复性.
GABAB受体、蛋白表达、大肠杆茵、蛋白纯化、复性
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Q78(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金30571429;国际科技合作项目2005DFA30830
2008-06-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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