过表达NDRG1对绵羊原代子宫内膜上皮细胞生物功能的影响

摘要：

子宫内膜上皮细胞作为子宫内重要的细胞之一,其生物功能的改变影响着雌性动物妊娠的发生.为了探究N-myc下游调节基因1(N-myc downstream regulated gene 1,NDRG1)的过表达对绵羊(Ovis aries)原代子宫内膜上皮细胞的生物功能的影响,本研究纯化原代绵羊子宫内膜上皮细胞,用瞬时转染的方法将NDRG1过表达载体导入原代子宫内膜上皮细胞,qRT-PCR和Western blot检测瞬时细胞模型的构建;用qRT-PCR检测细胞周期蛋白D1 基因(cyclin D1,CCND1)、CCNB1 和CCNA1、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关基因的表达;CCK-8法检测细胞的增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力.结果表明,pcDNA3.1-NDRG1组NDRG1基因及其蛋白的表达量极显著增高(P＜0.01);CCND1表达量极显著下降(P＜0.01);E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达量极显著增高(P＜0.01),波形蛋白基因(Vimentin)表达量极显著降低(P＜0.01);CCK-8结果显示,pcDNA3.1-NDRG1组增殖能力被抑制;划痕实验结果显示,pcDNA3.1-NDRG1组抑制细胞迁移能力.综上表明,NDRG1的过表达抑制了细胞的增殖,阻断了细胞周期G1/S的转变,抑制了其迁移能力,提示这与EMT过程相关.本研究为促进绵羊早期妊娠成功提供研究材料.

关键词：N-myc下游调节基因1(NDRG1)、原代子宫内膜上皮细胞、绵羊

所属期刊栏目：31

分类号：S826(家畜)

资助基金：兵团重点领域科技攻关计划项目;石河子大学创新发展专项

在线出版日期：2023-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2304-2312