马麝病毒性出血症RT-PCR诊断方法的建立及初步应用

摘要：

马麝病毒性出血症(Moschus chrysogaster(sifanicus)viral hemorrhagic disease,McVHD)为马麝的一种病毒性传染病,发病急、病死率高,严重威胁我国马麝种群的健康和安全.该病病原马麝出血症病毒(Moschus chrysogaster(sifanicus)hemorrhagic disease virus,McHDV)与杯状病毒科(Caliciviridae)兔病毒属(Lagovirus)的兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)高度同源.为建立该病快速简便的诊断方法,本研究对病原基因组序列及兔出血症病毒基因组序列进行比对分析,设计并合成引物McVHD-F/R,在反应条件优化及特异性和敏感性分析的基础上,建立马麝病毒性出血症的反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)诊断方法.结果表明,所建立的RT-PCR方法可在目标病毒基因组上扩增出1条448 bp的目的片段,而与沙门氏菌(Salmonella)、巴氏杆菌(Pasteurella multocida)、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)等10种病原微生物均无交叉反应,且病毒RNA最低检测量为10-5 ng/μL(2.38×103拷贝/μL).临床病料检测结果表明,该方法可快速、有效检出临床病料中的病毒核酸,且检测结果与病原分离结果一致.本研究建立的方法为马麝出血症的诊断和分子流行病学调查提供了技术支持.

关键词：马麝病毒性出血症(McVHD)、RT-PCR、诊断

所属期刊栏目：28

分类号：S852.62(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;甘肃农业大学创新训练计划

在线出版日期：2020-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：945-950