高邮鸭TNNI1基因克隆及组织表达分析

摘要：

慢速骨骼肌型肌钙蛋白(slow skeletal muscle troponin I 1,ssTNI,TNNI1)基因主要定位于慢收缩骨骼肌肌纤维,在肌肉发育中具有重要的作用.本研究旨在克隆高邮鸭(Anas platyrhynchos)TNNI1基因并分析其在不同组织中的表达规律.以高邮鸭为实验材料,利用5'和3'cDNA末端快速扩增(rapidamplification of cDNA ends,RACE)技术,克隆TNNI1基因全长cDNA序列并进行同源性分析;利用荧光定量PCR技术,检测TNNI1基因在70日龄高邮鸭不同组织中的表达差异和不同发育阶段肌肉组织中的表达规律.结果表明,TNNI1基因全长cDNA序列为965 bp,包括56 bp的5'UTR,345 bp的3'UTR和564 bp的ORF,编码187个氨基酸(GenBank登录号:KY926794).序列同源性分析发现,与北京鸭、鹌鹑(Coturnix japonica)、鸡(Gallus gallus)和哺乳动物TNNI1基因的同源性分别为97.9％、97.9％、97.3％和87.7％.系统进化树分析表明,高邮鸭与鹌鹑和鸡的亲缘关系最近,与哺乳动物亲缘关系较远.荧光定量PCR结果表明,TNNI1基因在本实验各个组织中均有表达,其中腿肌表达量最高,极显著高于其他组织(P＜0.01);其次是心脏、肺、胸肌、腺胃、肾脏和十二指肠组织;而大脑、肝脏、脾脏和下丘脑中表达量最低.21胚龄胸肌TNNI1基因表达量极显著高于腿肌(P＜0.01),其他发育阶段均是腿肌表达量显著高于胸肌(P＜0.05).高邮鸭TNNI1基因结构与组织表达特征的研究结果,为进一步研究TNNI1基因在鸭肌肉发育中的作用机制提供了基础资料.

关键词：高邮鸭、慢速骨骼肌型肌钙蛋白基因(TNNI1)、基因克隆、基因表达、肌肉组织

所属期刊栏目：26

分类号：S834.8(家禽)

资助基金：江苏省自然科学基金BK20151316;江苏省六大人才高峰项目NY-026;扬州市现代农业项目YZ2015039;扬州市科技公共服务平台建设项目YZ2016221

在线出版日期：2018-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：970-977