核糖体展示模拟抗体Anticalin基因文库的构建及初步鉴定

摘要：

脂质运载蛋白(lipocalin)是一类广泛存在于生物界的小分子蛋白质家族,具备一些抗体所没有的优点.为了构建库容量大、多样性好的核糖体展示模拟抗体Anticalin文库,本研究以脂质运载蛋白家族之一大菜粉蝶(Pieris brassicae)中提取到的胆汁三烯结合蛋白基因(bilin-binding protein, bbp)(GenBank登录号:X76568.1)为模板,设计了包含16个随机突变位点的引物,采用重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR, SOE-PCR)构建bbp基因文库.然后,利用SOE-PCR法引入核糖体展示元件(T片段与P片段),体外构建核糖体展示模拟抗体Anticalin基因文库.结果表明,本研究成功构建了模拟抗体Anticalin基因文库,其库容达到3.76× 1023,文库的可扩增性、完整性及多样性良好,为筛选多种小分子化学残留的模拟抗体提供了基础资料.

关键词：核糖体展示、Anticalin基因文库、胆汁三烯结合蛋白基因(bbp)、脂质运载蛋白、T7启动子

所属期刊栏目：22

分类号：R44;O65

资助基金：国家自然科学基金20907074;天津市应用基础与前沿研究计划重点项目09JCZDJC17700

在线出版日期：2014-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1166-1174