四环素调控基因(TetO)诱导重编程的猪体细胞系建立

摘要：

建立含有TetO-FUW-OSKM和FUW-M2rtTA的第二代猪(Sus scrofa domesticus)成纤维细胞,使其在添加强力霉素(doxycycline,DOX)而无需再次感染病毒的条件下可以重编程.将慢病毒(Lentiviral)质粒四环素调控基因(TetO)-FUW-OSKM和FUW-M2rtTA同时感染猪胎儿成纤维细胞(porcine embryonic fibroblasts,PEF),在添加DOX的培养条件下,形成诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs).随后,将iPSCs通过形成拟胚体(embryoid body,EB)再分化为成纤维样细胞,即TetO-PEF细胞.TetO-PEF携带TetO-FUW-OSKM和FUW-M2rtTA两个载体,且外源四因子拷贝数一致,在±DOX条件下调控四因子表达,直接驱动细胞重编程.本研究建立了TetO-PEF细胞系,为优化猪iPSCs培养条件提供了新的细胞资源.

关键词：猪、成纤维细胞、四环素调控基因(TetO)诱导系统、慢病毒、重编程

所属期刊栏目：22

分类号：S85;S81

资助基金：国家自然科学基金31371505;国家重大基础研究发展规划9732011CBA01002

在线出版日期：2014-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1065-1073