10.3969/j.issn.1674-7968.2013.09.008
奶山羊过氧化物酶体增殖物激活受体基因(PPARγ)的克隆、表达及功能初步分析
过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator activated receptor γ,PPARγ)在脂肪和糖代谢平衡中起重要作用.为研究奶山羊(Capra hircus)PPARγ基因在泌乳过程中的生理功能,本研究以西农萨能奶山羊乳腺组织为材料,利用RT-PCR和RACE技术,克隆奶山羊PPARγ基因cDNA全长;利用荧光定量PCR检测该基因在奶山羊10个组织以及不同泌乳时期乳腺组织中的表达量;利用PPARγ特异性激动剂罗格列酮(rosiglitazone,ROSI)处理乳腺上皮细胞后,荧光定量PCR检测细胞内脂肪酸代谢相关基因的表达量.结果表明,奶山羊PPARγ基因cDNA序列全长为1 751 bp(GenBank登录号为:HQ589347);同源性分析发现,PPARγ基因在哺乳动物间有较强的保守性;结构预测表明,奶山羊PPARγ蛋白具有2个锌指结构以及配体结合域;组织表达谱分析显示,PPARγ基因在奶山羊的脂肪组织中表达量最高,其次是瘤胃,而肌肉组织表达量最少;奶山羊两个泌乳时期乳腺组织中PPARγ表达量分析表明,泌乳盛期的表达量约是干乳期的2倍.罗格列酮处理乳腺上皮后检测发现,细胞内脂肪酸代谢相关基因:脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase,LPL)、.脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein,FABP3)、脂肪分化相关蛋白(adipose differentiation related protein,ADRP)和47 kD尾部相互作用蛋白(47-kD tail interacting protein,TIP47)等表达量显著性上调.研究结果提示,PPARγ基因在奶山羊泌乳过程的脂肪酸代谢中可能其重要作用,为进一步研究奶山羊个体水平调控乳脂生成、改善乳脂品质和发挥乳腺生物反应器功能提供基础资料.
奶山羊、PPARγ基因、组织表达、脂肪酸代谢
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S85;R73
公益性行业农业科研专项201103038;国家自然科学基金项目31072013;陕西省重大科技创新项目2009ZKC07-01
2013-11-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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