酵母双杂交筛选水稻OsMADS15互作蛋白

摘要：

蛋白间的相互作用对于生物学功能的发挥是非常重要的.MA DS-box基因的功能主要通过形成同源或异源二聚体或四聚体来实现.水稻OsMA DS15是一个AP1/SQUA亚家族的成员,在水稻开花时间调控、不定根的发育、茎的生长和内稃的发育等过程中具有重要作用,但与之有相互作用的蛋白却知之甚少.本实验用酵母双杂交法从水稻(Oryza sativa ssp.japonica)cDNA文库中筛选与OsMA DS15有相互作用的蛋白.构建了pGB KT7-OsMA DS15诱饵表达载体,然后与pGADT7-cDNA library共转化到酵母(Saccharomyces cerevisiae)AH109中,通过顺序筛选HIS3、A DE2和LacZ3个报告基因的表达,共得到25个UniGene.在烟草(Nicotiana benthamiana)细胞中用BIFC实验验证OsMADS15和候选基因OsMA DS1、OsMA DS14、Os MA DS8之间的相互作用,结果表明在烟草细胞的核内,OsMADS15相连的nYFP可以与OsMA DS1、OsMA DS14、Os MA DS8相连的cYFP分别形成互补而产生荧光,证实其间在植物体内也具有相互作用.本实验为今后近一步研究OsMADS15在水稻花发育和水稻营养器官生长发育中的功能提供了基础资料.

关键词：水稻、OsMADS15、酵母双杂交、cDNA文库、BIFC

所属期刊栏目：21

分类号：O62;R73

资助基金：国家高技术研究发展计划863项目2006AA10Z159

在线出版日期：2013-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：127-136