一种辣椒Rop GTPase激活蛋白基因的分离及其特征分析
Rop(Rho-related GTPase of plant)是植物中存在的一种特殊的小G蛋白.其与GTP(guanosine triphosphate)结合形成激活态,与GDP(guanosine diphosphate)结合形成失活态,并通过其激活态和失活态的转换启动和终止植物多种信号过程.Rop不同结合形式的转换受到一系列调控因子的调控.本研究以一个辣椒(Capsicum annuum L.)Rop蛋白(CaRop1)的组成型激活态CA-CaRop1为诱饵,利用ProQuestTM酵母双杂交体系,从辣椒幼苗猎物文库中分离获得一种Rop GTPase激活蛋白(Rop GTPase activating proteins,RopGAP)基因,将其命名为CaRopGAP3.生物信息学分析表明,CaRoGA P3全长1 597 bp,包含一个1 437bp的开放阅读框,编码478个氨基酸,其氨基酸序列不仅含有3个保守的GAP结构域,其N端还含有CRIB(Cdc42/Rac-interactive binding motif)结构域,属于植物特有的一类RopGAP亚家族.酵母双杂交验证显示CaRopGAP3只能与组成型激活态(CA)的CA-CaRop1互作而不能与显性失活态(DN)的DN-CaRop1互作,且含CRIB结构域的N端对他们之间的互作没有明显的调控作用.亚细胞定位分析显示,CaRopGAP3主要分布于细胞膜上,且含CRIB结构的N端在其膜定位中起重要调节作用.荧光定量PCR分析显示,CaRop GA P3基因在辣椒幼叶中的表达量最高,约为幼根的17倍、成熟根和花器官的8倍.CaRopGAP3基因的这种结构及组织表达特点可能与其参与的特定信号路径密切相关.本研究为进一步解析辣椒CaRop1介导的信号调控机制提供基础数据.
辣椒、RopGAP、CRIB、酵母双杂交、亚细胞定位
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S64;R31
国家自然基金项目30600391、30971718;高校博士点基金20093515110004;福建省自然基金重点项目2008J0003;福建省自然基金2008J0049;福建省创新人才项目2007F3013;福建省科技重点项目2008N0099
2013-01-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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