脱氢表雄酮(DHEA)对鸡胚原代肝细胞cAMP/PKA信号通路和cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的影响与调节

摘要：

控制肉鸡脂肪过多沉积是肉鸡生产中亟待解决的问题.脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)是人体分泌最为丰富的肾上腺类固醇激素,可经由类固醇激素受体介导发挥生理功能,降低机体生脂能力.本研究以鸡胚原代肝细胞为研究对象,选用含DHEA终浓度为0(对照)、0.01、0.1、1.0、10和100μmol/L的培养液孵育肝细胞20 min后收集细胞,放射免疫测定法(RIA)检测胞内cAMP水平.结果发现,0.1～100 μmol/L DHEA孵育肝细胞均可显著提高胞内cAMP水平(P＜0.05),其中0.1 μmnol/L DHEA效果最为显著(P＜0.01).0.1 μmol/L DHEA孵育肝细胞20 min或1h后收集细胞,RIA法分别检测胞内腺苷酸环化酶(adenylate cyclase,AC)和磷酸二酯酶(phosphodiesterase,PDE)活性,(γ-32P)ATP掺入法测定cAMP依赖性蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)活性,Western blot法测定cAMP反应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)磷酸化水平.结果显示,0.1 μmol/L DHEA孵育肝细胞20min可显著降低胞内PDE活性(P＜0.05),提高PKA活性(P＜0.05),但对AC活性无显著性影响(P＜0.05).0.1 μmol/L DHEA处理肝细胞1h可显著提高CREB蛋白磷酸化水平(P＜0.05),且这种效应可被PKA抑制剂阻断(P＞0.05).本研究结果提示,DHEA调控肉鸡肝脏脂肪代谢,降低脂肪沉积的机制可能与激活胞内cAMP/PKA信号系统,活化转录因子CREB有关.

关键词：脱氢表雄酮(DHEA)、鸡胚原代肝细胞、肝脏脂肪代谢、cAMP/PKA信号通路、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)

所属期刊栏目：20

分类号：R3 ;S81

资助基金：国家自然科学基金项目30600439

在线出版日期：2012-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：649-656