10.3969/j.issn.1674-7968.2010.06.006
玉米In5-2启动子功能区域在洋葱瞬时表达系统中的分析
本研究旨在通过对根癌农杆菌侵染洋葱表皮细胞的条件进行优化,从而建立一种新的瞬时表达系统,并将其应用于玉米In5-2启动子的功能区域的分析中,明确In5-2启动子的乙酰苯胺类化合物诱导元件的具体位置.在本研究中采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)侵染洋葱(Allium cepa)表皮细胞,对转β-葡糖醛酸酶(GUS)基因的瞬时表达进行研究,并分析了侵染液中乙酰丁香酮(As)的浓度、侵染时间、菌液浓度、共培养时间对GUS基因的瞬间表达的影响.结果显示,在OD600值为0.8的农杆菌液中感染15 min,共培养3 d,能够得到较高的GUS基因瞬间表达,从而建立了一种新的瞬间表达系统.同时,构建了含不同长度的玉米(Zea mays)In5-2启动子片段缺失载体,利用新的瞬时表达系统分析其功能区域,推测出乙酰苯胺类化合物诱导元件位于ATG上游-220~-143 bp之间.结果表明新的瞬时表达系统可以快速有效地进行启动子的分析.
洋葱表皮细胞、根癌农杆菌、GUS基因、瞬时表达、玉米In5-2启动子
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R ;U49
农业部948项目2008-ZA1
2011-06-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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1073-1078