利用外源基因侧翼序列扩增筛选番茄纯合转基因植株

摘要：

传统的纯化外源基因的方法主要是通过多代自交,该方法耗时长,效率低.对转基因材料中外源基因T-DNA区域插入位点两翼序列的分析和扩增,是在转基因后代中筛选纯合转基因植株的新方法.首先,利用酶切连接接头的PCR方法,在番茄(Lycopersicon esculentum)转基因植株中扩增外源基因Avr3a的两翼序列并测序;然后通过该序列设计的引物在转基因植株中验证,得到的两翼序列通过与SGN数据库比对分析,结果发现,外源基因的插入位点有40 bp的碱基缺失;最后利用侧翼序列和边界序列设计的引物.在转基因T1代植株中筛选出纯合单株,这些植株在T2代进行验证确实为纯合单株.

关键词：转基因番茄、侧翼序列扩增、纯合植株筛选

所属期刊栏目：17

分类号：S188(农业生物学)

资助基金：农业部"引进先进农业科学技术"项目2007-Z5;国家自然科学基金项目30671319

在线出版日期：2009-12-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：820-824