转增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)猪羊水干细胞的体外分化

摘要：

利用羊水干细胞培养技术体系,从胎龄30 d猪胎儿羊水中分离培养羊水干(AFS)细胞;通过脂质体介导转染技术,将增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)导入羊水干细胞,诱导转基因羊水干细胞贴壁分化,观察其体外增殖、分化特点;采用RT-PCR技术检测干细胞和分化细胞表面标志或相关基因.结果表明,成功地分离培养出羊水干细胞,获得转EGFP基因羊水干细胞,羊水干细胞在表达EGFP的同时仍具有分化潜能.羊水干细胞中Oct4(octamer transcription factor 4)、CD-90和Sox2表达阳性;体外诱导的羊水干细胞可以分化为成骨细胞,表达骨连接蛋白(osteonectin)和骨钙素(osteocalcin);可以分化为肌细胞,检测到生肌决定因子6(myogenic factor6,myf-6)和生肌决定基因(myogenic determination gene,MyoD).从猪胎儿羊水分离羊水干细胞具有可行性和有效性,转EGFP基因羊水千细胞具有自我更新、增殖和分化潜能,可以用EGFP对羊水干细胞进行标记、追踪.

关键词：羊水干细胞、EGFP基因、细胞标记、细胞分化、猪

所属期刊栏目：17

分类号：S188(农业生物学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863项日2008AA101006;西北农林科技大学科研专项07ZR001

在线出版日期：2009-12-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：792-796