猪三十九肽胆囊收缩素(CCK39)基因的克隆和表达

摘要：

以猪十二指肠中提取的总RNA为模板,根据GenBank已发表的猪三十九肽胆囊收缩素(CCK39)基因序列设计1对特异性引物.用RT-PCR扩增CCK39基因的cDNA,纯化后克隆入pUC18载体,BamHⅠ/EcoRⅠ双酶切后插入pGEX-6P-1质粒获得原核表达载体.0.5mmol/L IPTG诱导表达并纯化产物,以纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备单因子血清;用抗GST抗体和自制的抗CCK39的单因子血清Westenblot检测融合蛋白.结果表明:成功地克隆出CCK39基因的cDNA,构建的原核表达载体pGEX-CCK39成功地表达约32kD的融合蛋白,抗GST抗体和抗CCK39单因子血清能识别融合蛋白,证明获得的融合蛋白具有较好的抗原性,为制备抗CCK抗体及研究CCK的各种生理功能提供大量、低廉和抗原性较强的胆囊收缩素.

关键词：胆囊收缩素、克隆、表达、抗GST抗体、单因子血清

所属期刊栏目：13

分类号：S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)

在线出版日期：2005-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：612-615